甘露飲中多種成分相輔相成、協(xié)同作用是其藥理作用的重要基礎(chǔ)，而各種潛在活性成分的含量與臨床治療效果密切相關(guān)。綠原酸是茵陳的有效成分之一，具有清除體內(nèi)自由基、抗氧化、抗菌、抗病毒和保肝利膽等作用。在國內(nèi)外研究中分別關(guān)于綠原酸、麥角甾苷、柚皮苷、黃芩苷、甘草酸和熊果酸的含量提取及測定方法有相關(guān)報道，而甘露飲中多種代表性活性成分的提取及同時定量，國內(nèi)外尚未見文獻(xiàn)報道。因此，本實驗上海博訊采用了正交試驗法，以6種有效成分綠原酸、麥角甾苷、柚皮苷、黃芩苷、甘草酸和熊果酸的含量為指標(biāo)，對甘露飲的提取工藝進(jìn)行研究，優(yōu)選出最佳提取工藝，同時建立了HPLC法測定6種有效成分的含量，為完善甘露飲質(zhì)量評價標(biāo)準(zhǔn)和臨床用藥提供依據(jù)。
1260 高效液相色譜儀（美國安捷倫科技有限公司）；烘箱（上海博訊醫(yī)療生物儀器股份有限公司）；XW-80A 型旋渦混合器（上海青浦瀘西儀器廠）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（德國 IKA）；CP225D 型電子天平（德國賽多利斯公司）；粉碎機（吉首市中誠制藥機械廠）。
上海博迅BXH-65S精密可程式烘箱
方差分析結(jié)果表明提取時間對熊果酸、甘草酸、柚皮苷、綠原酸的提取含量影響顯著；黃芩苷的提取含量受料液比、提取時間、提取次數(shù)的影響當(dāng)；提取時間、提取次數(shù)對麥角甾苷的提取含量影響不顯著。料液比、提取時間對甘草酸的提取含量有顯著影響：料液比1:8、提取時間為1h得到甘草酸含量最多，即序號4為最優(yōu)；提取次數(shù)對綠原酸含量有顯著影響：提取次數(shù)為1次，綠原酸含量最多，即第3因素下1水平為最優(yōu)方法。液料比、提取時間、提取次數(shù)對熊果酸、黃芩苷、柚皮苷、麥角甾苷提取含量影響并不顯著。綜合以上實驗結(jié)果，最佳提取工藝條件是：甘露飲提取溶劑為60%乙醇，料液比1:4、提取時間為1h、提取次數(shù)為1次。
試驗考察了甲醇、乙腈、緩沖鹽種類和濃度對樣品分離的影響，最后確認(rèn)乙腈和0.1% 磷酸溶液進(jìn)行梯度洗脫后，各色譜峰分離度好，保留時間適中，基線穩(wěn)定，綠原酸、黃芩苷、甘草酸和熊果酸峰型和分離度均較好，而麥角甾苷與柚皮苷由于自身化學(xué)性質(zhì)和方劑中含量差異的影響，能實現(xiàn)基線分離。經(jīng)過方法學(xué)考察試驗，本文上海博訊建立的含量檢測方法準(zhǔn)確、可靠，重復(fù)性好，可用于同時測定甘露飲中多種物質(zhì)的含量，為甘露飲質(zhì)量控制及綜合評價提供了借鑒。
