上海博訊醫(yī)療生物儀器股份有限公司調(diào)查發(fā)現(xiàn)近年來，已經(jīng)成為生物制藥有效途徑之一的是將生物活性成分從天然產(chǎn)物中提取出來。挑選天然藥物最主要的原料一直以植物為主，但用于藥用 的植物中活性物質(zhì)在其組織中含量一般很低，如果 為了自身利益，人們一直過度使用野生藥用植物資 源，該物種就會(huì)瀕危直至滅絕，這樣就會(huì)使環(huán)境遭到破壞，還會(huì)破壞生物多樣性。為了解決環(huán)境資源問題，近年來，研究了野生藥用植物的熱點(diǎn)，重點(diǎn)是藥用植物的內(nèi)生真菌。研究表明，內(nèi)生真菌的祖先可能是植物 病原體，長(zhǎng)期存在于植物組織中，與寄主植物“共同進(jìn)化”，因此在此過程中，形成的代謝物可能與宿主植物相同或相似。許多物質(zhì)都有多種活性。內(nèi)生真菌，從不同植物中分離純化出來，其種類數(shù)目不同，少的有幾種到十幾種，多的有幾百種。上海博訊生物儀器股份有限公司通過對(duì)蒲公英內(nèi)生真菌的培養(yǎng)、純化和鑒定，為將藥用微生物資源更好地開發(fā)奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。
1儀器
電子分析天平，北京賽多利斯儀器公司產(chǎn)品；超凈工作臺(tái)，蘇州止痙凈化設(shè)備有限公司產(chǎn)品；生化恒溫培養(yǎng)箱；上海博訊醫(yī)療生物儀器股份有限公司，高壓蒸汽滅菌鍋，上海博訊醫(yī)療生物儀器股份有限公司；電熱鼓風(fēng)干燥箱，北京科威永興儀器有限公司產(chǎn)品。
2 制作培養(yǎng)基
稱取土豆200g，經(jīng)清潔、去皮后切成塊，用蒸餾水煮沸，紗布折疊成8層，然后過濾，加入20g葡萄糖，并加入20g瓊脂。化妝用1L量筒至1000mL和分配到3個(gè)錐形瓶中，然后用高壓蒸汽鍋滅菌。除菌后，將介質(zhì)的溫度降低至約55℃，并加入青霉素鈉的80×104U和100×104U硫酸鏈霉素去除內(nèi)生 細(xì)菌。倒30個(gè)平板，放置于超凈臺(tái)內(nèi)，等待接種。
3 內(nèi)生真菌的培養(yǎng)
選擇沒有害蟲和傷口的新鮮蒲公英并用無(wú)菌水沖洗。上海博訊醫(yī)療生物儀器股份有限公司在超潔凈平臺(tái)上，采用組織切割法采集植物的莖、葉和根，用手術(shù)刀將蒲公英的莖和根切成0.5cm×0.5cm×0.5cm，0.5cm×0.5cm的小塊。將切割的材料置于乙醇中2，4min，并比較消毒時(shí)間。將混合物用蒸餾水洗滌3次，然后將該材料置于浸有汞 的溶液中浸泡2min，用蒸餾水沖洗3次，并置于無(wú)菌濾紙上。吸去水后，將其分別置于含有硫酸鏈 霉素的培養(yǎng)基上，在各板上放置4片，密封膜，在30℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3~7d。 另在一個(gè)平板內(nèi)倒入無(wú)菌水，與上述平板一起放 入培養(yǎng)箱中，觀察是否有細(xì)菌長(zhǎng)出，作為無(wú)菌參照。
4 結(jié)論
作為微生物資源的植物內(nèi)生微生物，較普遍地存在于植物中。上海博訊拿其與通常的微生物相比，植物內(nèi)生微生物對(duì)植物表現(xiàn)出一定的親和力。植物又是內(nèi)生微 生物賴以生存的物質(zhì)基礎(chǔ)，植物生產(chǎn)極大地關(guān)系到社會(huì)的繁榮和發(fā)展。因此，植物內(nèi)生微生物研究、資源的積累及其操作技術(shù)和利用技術(shù)的研究有著重要意義。
